2',7'-二氯荧光素二乙酸酯

英文名：H2DCFDA

别名：2-(3,6-二乙酰氧基-2,7-二氯-9H-氧杂蒽-9-基)苯甲酸;2'',7''-二氯二氢代荧光黄二醋酸;2,7-二氯二氢代荧光黄二醋酸;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯;2,7-二氯二氢荧光素乙酰乙酸;2'',7''-二氯荧光素二乙酸酯;2',7'-二氯荧光素二乙酸酯;2',7'-二氯螢光素二乙酸酯;2‘,7‘-二氯荧光素二乙酸酯;5-乙酰氨基-1,3,4-噻二唑;DCFH-DA 活性氧ROS荧光探针;2,7-二氯荧光素二乙酸酯;2´,7´-二氯二氢荧光素二乙酸酯;二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯;活性氧ROS荧光探针;2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯;2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯

CAS No. : 4091-99-0

分子式：C24H16CL2O7

分子量：487.29

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中文名称：	2',7'-二氯荧光素二乙酸酯
英文名称:	H2DCFDA
产品分类：	荧光探针与染料
CAS号：	4091-99-0
分子式：	C24H16CL2O7
分子量：	487.29

*产品基础信息：
【产品中文名称】2',7'-二氯荧光素二乙酸酯;
【产品英文名称】H2DCFDA;
【纯度指标】97.04%;
【品牌】TargetMol;
【CAS号】4091-99-0;
【浓度】;

Product Introduction

Bioactivity

名称	H2DCFDA
描述	H2DCFDA (DCFH-DA) belongs to the class of green fluorescent dyes and is a probe for the detection of intracellular reactive oxygen species (ROS) (Ex/Em=488/525 nm) with cell membrane permeability.
细胞实验	使用方法：一、溶液配制 1. 制备储存液：用 DMSO 配制 10 mM 的 H2DCFDA 储备液。注：H2DCFDA 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。 2.工作液的配制：用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 H2DCFDA工作液。注：请根据实际情况调整 H2DCFDA 工作液浓度，且现用现配。二、细胞染色（悬浮细胞） 1. 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×10^6/mL。 2. 加入 1 mL 染料工作液，室温孵育 5-30 分钟。 3. 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。 4.加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。 5.用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。三、细胞染色（贴壁细胞） 1. 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。 2. 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。 3. 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。 4. 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。注：若需要用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化重悬后再进行染色。以上信息均来源于已发表文献，具体实验方案请根据实际研究需求进行适当调整。
体外活性	方法：Flow cytometry 检测 ROS 水平： 1、将 H2DCFDA 溶解为 10 mM 的 DMSO 原液，并在使用前用 PBS 进一步稀释。 2、将粘附细胞与 5 µM H2DCFDA 溶液在 37℃ 下避光孵育 30 min，然后用 0.05% trypsin-EDTA 溶液收获，悬浮在新鲜培养基中，并立即用流式细胞仪 (488 nm) 进行分析。[1] 方法：Confocal microscopy 检测 ROS 水平： 1、将 H2DCFDA 溶解为 10 mM 的 DMSO 原液，并在使用前用 PBS 进一步稀释。 2、将含有细胞的盖玻片置于 5 µM H2DCFDA 染色溶液中，在 37℃ 下避光孵育 60 min，然后清洗并用配备有氩激光器的共焦激光扫描显微镜 Leica TCS SL 成像。[1] 以上信息均来源于已发表文献，具体实验方案请根据实际研究需求进行适当调整。
体内活性	方法：fluorescence microscope 分析 LPS 诱导腹膜炎小鼠的氧化活性： 1、将 H2DCFDA 溶解在 100 µL 乙醇中，并在使用前用 PBS 进一步稀释。 2、C57BL/6J 小鼠腹腔注射 LPS (0.1-1mg/mL) 诱导腹膜炎。3.5 h 后，腹腔注射 H2DCFDA (0.1-0.8 mg/ml)。 3、H2DCFDA 注射后 30 min，颈椎脱臼处死动物，用 pH 7.4 的 5 mL 冰冷 HBSS 溶液冲洗，回收腹膜细胞。 4、腹膜细胞用 PBS 洗涤并重悬。在 37℃ 聚苯乙烯培养皿中孵育 30 min，用粘附法除去巨噬细胞。回收上清液，用细胞离心器将大约 20000-25000 个白细胞加到显微镜载玻片上。然后使用荧光显微镜对载玻片进行分析。[2]
存储条件	Keep away from direct sunlight,Store at low temperature,Keep away from moisture, Powder: -20°C for 3 years \| In solvent: -80°C for 1 year Shipping with blue ice/Shipping at ambient temperature.
溶解度	Ethanol : 14.29 mg/mL (29.33 mM), Sonication is recommended. DMSO : 257.5 mg/mL (528.43 mM), Sonication is recommended. 10% DMSO+40% PEG300+5% Tween 80+45% Saline : 5 mg/mL (10.26 mM), Solution.
关键字	ReactiveOxygenSpecies \| Reactive Oxygen Species \| Inhibitor \| inhibit \| H-2DCFDA \| H2DCFDA \| 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate \| 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein
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